Question

【題目】三孢布拉式霉菌是一種可產生胡蘿卜素的真菌，常用于胡蘿卜素的工業(yè)化生產�；卮鹣铝袉栴}：

（1）配制三孢布拉式霉菌的培養(yǎng)基時，需將pH調至____（填“酸性”、“中性”或“微堿性”）。

（2）將發(fā)酵后的三孢布拉式霉菌處理后研磨成粉末，加入________________ （填“石油醚”、“乙醇”或“丙酮”）萃取，選擇該萃取劑的依據是：具有較高的沸點，能夠充分溶解胡蘿卜素，并且________________________ 。

（3）將提取的胡蘿卜素粗品通過________法進行鑒定，據如圖結果可判斷出樣品 2 中含有胡蘿卜素，判斷依據是__________________________________ 。

（4）研究者利用聚丙烯酰胺凝膠電泳對三孢布拉氏霉菌的蛋白質進行分離，為了消除蛋白質分子原有電荷量對遷移率的影響，可在凝膠中加入________，原理是___________________________，因而掩蓋了不同種蛋白質間的電荷差別，使電泳遷移率完全取決于蛋白質分子的大小。

Answer 1

【答案】酸性 石油醚 不與水混溶 紙層析 樣品2具有與標準樣對應的色帶1 SDS SDS能與各種蛋白質形成蛋質—SDS混合物，SDS所帶負電荷的量大大超過了蛋白質分子原有的電荷量

【解析】

1、胡蘿卜素的提�。�

（1）胡蘿卜素的性質：胡蘿卜素是橘黃色結晶，化學性質比較穩(wěn)定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有機溶劑。

（2）胡蘿卜素的提取來源：提取天然胡蘿卜素的方法主要有：一是從植物中提取；二是從大面積養(yǎng)殖的巖藻中獲得；三是利用微生物的發(fā)酵生產。

（3）萃取劑：最適宜作胡蘿卜素萃取劑的是石油醚。

（4）實驗流程：胡蘿卜→粉碎→干燥→萃�。ㄊ�油醚）→過濾_→濃縮→胡蘿卜素→鑒定（紙層析法）。

2、凝膠電泳法：

（1）原理：不同蛋白質的帶電性質、電量、形狀和大小不同，在電場中受到的作用力大小、方向、阻力不同，導致不同蛋白質在電場中的運動方向和運動速度不同。

（2）分離方法：瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳等。

（3）分離過程：在一定pH下，使蛋白質基團帶上正電或負電；加入帶負電荷多的SDS，形成“蛋白質-SDS復合物”，使蛋白質遷移速率僅取決于分子大小。

（1）在三孢布拉氏霉菌的發(fā)酵培養(yǎng)基中，為其提供氮源成分的是玉米蛋白水解物和豆粕。在制備該培養(yǎng)基的過程中，滅菌之前應將培養(yǎng)基的pH調至酸性。

（2）萃取胡蘿卜素選用石油醚，其原因是石油醚具有較高的沸點，能夠充分溶解胡蘿卜素，并且不與水混溶。

（3）提取的胡蘿卜素粗品通過紙層析法進行鑒定，據圖示結果可判斷出樣品2中含有胡蘿卜素，判斷依據是樣品2具有與標準樣對應的色帶1。

（4）利用聚丙烯酰胺凝膠電泳對三孢布拉氏霉菌的蛋白質進行分離，為了消除蛋白質分子原有電荷量對遷移率的影響，可在凝膠中加入SDS，原理是SDS能與各種蛋白質形成蛋白質-SDS混合物，SDS所帶負電荷的量大大超過了蛋白質分子原有的電荷量，因而掩蓋了不同種蛋白質間的電荷差別，使電泳遷移率完全取決于蛋白質分子的大小。