Question

【題目】苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質，自然界中存在著降解苯酚的微生物．某工廠產(chǎn)生的廢水中含有苯酚，為了降解廢水中的苯酚，研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細菌菌株，篩選的主要步驟如圖所示，①為土壤樣品．請回答下列問題：

（1）②中培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應加入 作為碳源，②中不同濃度碳源的培養(yǎng)基 （A．影響；B．不影響）細菌的數(shù)量，如果要測定②中活細菌數(shù)量，常采用 法．

（2）④為對照，微生物在④中不生長，在⑤中生長，④的培養(yǎng)基與⑤的培養(yǎng)基最主要的區(qū)別是 ；使用 法可以在⑥上獲得單菌落．

（3）采用固體平板培養(yǎng)細菌時為什么進行倒置培養(yǎng)？

（4）如何比較不同菌株降解苯酚能力的大��？ ．

Answer 1

【答案】（1）苯酚 A 稀釋涂布平板（活菌計數(shù)或菌落計數(shù)）

（2）不含苯酚 稀釋涂布平板法或平板劃線法

（3）避免培養(yǎng)過程產(chǎn)生的水分影響微生物的生長

（4）用同樣苯酚濃度的培養(yǎng)液培養(yǎng)不同菌株，一定時間后，測定培養(yǎng)液中苯酚含量

【解析】

試題分析：從土壤中分離微生物的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株．選擇分離過程中需要使用選擇培養(yǎng)基，做到全過程無菌操作．常用的固體培養(yǎng)基上的接種方法是稀釋涂布平板法和平板劃線法．

解：（1）②中的選擇培養(yǎng)基中應加入苯酚作為碳源，以增大降解苯酚細菌的濃度．②中不同濃度碳源的培養(yǎng)基會影響細菌濃度．測定②中活細菌數(shù)量，常采用稀釋涂布平板法．

（2）④與⑤培養(yǎng)基的主要區(qū)別在于④的培養(yǎng)基沒有加入苯酚作為碳源，⑤培養(yǎng)基的中加入苯酚作為碳源．使用釋涂布平板法或平板劃線法可以在⑥上獲得單菌落．

（3）采用固體平板培養(yǎng)細菌時要倒置培養(yǎng)，以防止冷凝后形成的水珠滴落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基．

（4）比較不同菌株降解苯酚能力可以設計實驗如下：用同樣苯酚濃度的培養(yǎng)液培養(yǎng)不同菌株，一定時間后，測定培養(yǎng)液中苯酚含量．

故答案為：

（1）苯酚 A 稀釋涂布平板（活菌計數(shù)或菌落計數(shù)）

（2）不含苯酚 稀釋涂布平板法或平板劃線法

（3）避免培養(yǎng)過程產(chǎn)生的水分影響微生物的生長

（4）用同樣苯酚濃度的培養(yǎng)液培養(yǎng)不同菌株，一定時間后，測定培養(yǎng)液中苯酚含量