Question

【題目】高濃度酒精會抑制酵母菌活性，因而在米酒制作中，要篩選耐酒精能力較強(qiáng)和發(fā)酵性能優(yōu)良的酵母菌。某實驗小組進(jìn)行了如下實驗：

（1）準(zhǔn)備：1酵母菌在-20℃長期保存，菌液中常需要加入一定量的____________（氯化鈣、蒸餾水或甘油）

2為了解發(fā)酵液中酵母菌的數(shù)量，可采用_______________法接種。若1mL發(fā)酵液稀釋105倍，在三個平板上分別接入0.2mL稀釋液，經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，三個平板上的菌落數(shù)分別為33、38、37，則1mL發(fā)酵液中有__________個酵母菌。

（2）原理：由于酵母菌在酒精發(fā)酵中產(chǎn)生_________，隨著發(fā)酵時間的延續(xù)，瓶重逐漸減輕。

（3）步驟：1 將等量的三種品系酵母菌分別接種在_________濃度為6%、8%、10%、12%的等量液體培養(yǎng)基中。

2 在相同且適宜條件下密閉發(fā)酵。

3 每天相同時間，輕輕搖晃瓶子后，____________，并稱重發(fā)酵瓶。

（4）結(jié)果分析：在某濃度下，小組測定實驗結(jié)果如圖所示。

根據(jù)圖示，則Y1比Y3更適合作為生產(chǎn)米酒的菌種。理由是________________。

Answer 1

【答案】 甘油 稀釋涂布平板 1.8×107 CO2 酒精 擰松瓶蓋(或放氣) Y1菌在1-4天（前期/初期）的失重量（產(chǎn)生CO2的量/發(fā)酵速率/發(fā)酵能力）大于Y3（Y3前期發(fā)酵能力不如Y1），所以Y1耐酒精能力強(qiáng)

【解析】試題分析：菌種長期保存應(yīng)采用甘油管藏法，保存在-20℃的環(huán)境中。為了分離、純化和計數(shù)酵母菌，常常采用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種培養(yǎng)，等到平板上形成穩(wěn)定的菌落后，然后選取菌落數(shù)范圍落在30—300個的稀釋倍數(shù)作為估算的數(shù)據(jù)，進(jìn)行求平均值。為了篩選耐酒精能力較強(qiáng)和發(fā)酵性能優(yōu)良的酵母菌，應(yīng)將不同品系的酵母菌接種在不同酒精濃度的培養(yǎng)液中，依據(jù)酵母菌在酒精發(fā)酵中產(chǎn)生CO2而導(dǎo)致培養(yǎng)液質(zhì)量減輕的多少為指標(biāo)，推測不同品系的酵母菌的耐酒能力和發(fā)酵性能。分析實驗結(jié)果的三條曲線可知，Y1和Y2都比Y3耐酒能力強(qiáng)且發(fā)酵性能好；并且Y1菌在1-4天（前期/初期）的失重量（產(chǎn)生CO2的量/發(fā)酵速率/發(fā)酵能力）大于Y3（Y3前期發(fā)酵能力不如Y1），所以Y1耐酒精能力最強(qiáng)。

（1）根據(jù)前面的分析可知，長期保藏菌種的試管內(nèi)應(yīng)加甘油，一方面防止外來雜菌干擾，另一方面隔絕空氣。

（2）根據(jù)前面的分析可知，分離計數(shù)培養(yǎng)液中菌體數(shù)量，應(yīng)選用稀釋涂布平板法接種。根據(jù)題意，1mL發(fā)酵液中有（33+38+37）÷3÷0.2×105=1.8×107個酵母菌。

（3）為了篩選耐酒精能力較強(qiáng)和發(fā)酵性能優(yōu)良的酵母菌，依據(jù)的原理是酵母菌在酒精發(fā)酵中產(chǎn)生CO2逐步釋放，所以隨著發(fā)酵時間的延續(xù)，瓶重逐漸減輕。

（4）本實驗的思路：將等量的三種品系酵母菌分別接種在不同酒精濃度的等量液體培養(yǎng)基中，放在相同且適宜條件下密閉發(fā)酵，每天相同時間，輕輕搖晃瓶子后，擰松瓶蓋釋放CO2氣體，并稱重發(fā)酵瓶。分析實驗結(jié)果，Y1菌在1-4天（前期/初期）的失重量（產(chǎn)生CO2的量/發(fā)酵速率/發(fā)酵能力）大于Y3（Y3前期發(fā)酵能力不如Y1），由于Y1比Y3更適合作為生產(chǎn)米酒的菌種。