Question

【題目】為了提高菊花抗凍能力，研究者從其他生物中克隆出抗凍基因C（圖1），擬將其與質(zhì)粒（圖2）重組，再借助農(nóng)桿菌導(dǎo)入菊花中�；卮鹣铝袉栴}：

（1）為使抗凍基因C在菊花細(xì)胞中高效表達(dá)，需要把目的基因片段插入表達(dá)載體的_________、_______之間。

（2）若想了解C基因是否整合到菊花染色體上，檢測方法是采用_________________技術(shù)。

（3）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（抗凍基因C已經(jīng)整合到菊花的基因組中）抗凍能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是__________________________。

（4）借助農(nóng)桿菌將重組質(zhì)粒導(dǎo)入菊花細(xì)胞，在該過程中需添加酚類物質(zhì)，目的是________從個體水平檢測抗凍基因C的遺傳特性是否正常表達(dá)的方法是______________________。

（5）科研工作者可以利用PCR技術(shù)獲得更多的抗凍基因C，那么利用PCR技術(shù)獲取目的基因的前提是 ______________________________________________________。

Answer 1

【答案】啟動子 終止子 DNA分子雜交技術(shù) 目的基因的轉(zhuǎn)錄或翻譯異常 吸引農(nóng)桿菌感染菊花細(xì)胞 將轉(zhuǎn)基因菊花放寒冷（或低溫）條件下培養(yǎng)，觀察其生長狀況 要有一段已知目的基因的核苷酸序列

【解析】

基因工程的操作步驟是：1、獲取目的基因（從基因組文庫中獲取或利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因）、2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建（這也是基因工程的核心）3、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞（植物、動物、微生物）4、目的基因的檢測與鑒定 （DNA分子雜交技術(shù),分子雜交技術(shù)、抗原抗體雜交）。

（1）為抗凍基因C在菊花細(xì)胞中高效表達(dá)，需要把目的基因片段插入表達(dá)載體的啟動子、終止子之間，其中啟動子的功能是啟動目的基因的轉(zhuǎn)錄過程，終止子的功能是終止目的基因的轉(zhuǎn)錄過程。

（2）檢測目的基因是否整合到受體細(xì)胞的染色體上，可采用DNA分子雜交技術(shù)。

（3）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（抗凍基因C已經(jīng)整合到菊花的基因組中）而抗凍能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是目的基因的轉(zhuǎn)錄或翻譯異常。

（4）將基因表達(dá)載體導(dǎo)入植物（菊花）細(xì)胞常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，在該過程中需添加酚類物質(zhì)，目的是吸引農(nóng)桿菌感染菊花細(xì)胞。從個體水平檢測抗凍基因C的遺傳特性是否正常表達(dá)的方法是，將轉(zhuǎn)基因菊花放寒冷（或低溫）條件下培養(yǎng)，觀察其生長狀況。

（5）利用PCR技術(shù)獲取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物。